%0 Journal Article %T flt-1启动子在血管内皮细胞中特异生物活性的检测及其意义 %A 诸葛福媛 %A 吕智美 %A 郑宏庭 %A 章涛 %A 邓华聪 %J 中国生物工程杂志 %D 2009 %X 目的:构建带有组织特异性flt-1启动子的真核表达载体,检测其在转染的人脐静脉内皮细胞(huvec)中对荧光素酶报告基因表达的驱动能力。方法:采用pcr扩增flt-1启动子,插入到pgl3-basic-luc载体中,构建携带flt-1启动子的真核表达载体pgl3-flt-basic-luc,经脂质体法转染huvec、hepg2、nih3t3和hek293细胞,于转染48h后采用双荧光报告系统检测荧光素酶表达活性。结果:酶切及测序证实构建的pgl3-flt-basic-luc载体中含有序列正确的flt-1基因启动子,双荧光报告系统检测显示,转染的huvec细胞其荧光素酶活性明显高于hek293细胞(p<0.01),而转染的hepg2和nih3t3细胞中未检测出荧光素酶表达。结论:克隆的flt-1启动子具有较高的血管内皮特异性转录活性,可作为血管疾病靶向基因治疗的启动子来源。图 %K 启动子 %K flt-1 %K 载体构建 %K 人脐静脉内皮细胞 %K 基因治疗 %K 血管疾病 %U http://159.226.100.150:8082/biotech/CN/abstract/abstract11967.shtml