抑制x染色体连锁的凋亡抑制蛋白(xiap)和survivin表达对胰腺癌panc-1细胞增殖及化疗敏感性的影响

？目的：探讨同时抑制x染色体连锁的凋亡抑制蛋白(x-linkedinhibitorofapoptosisprotein,xiap)和survivin表达，对胰腺癌panc-1细胞增殖及吉西他滨（gem）化疗敏感性的影响，并与单独抑制xiap或survivin表达的策略进行对比。方法：运用前期实验构建的xiap-shrna慢病毒（lv-x）和survivin-shrna慢病毒（lv-s），分别建立xiap和/或survivin表达稳定抑制的胰腺癌panc-1细胞株，即panc-1-x、panc-1-s和panc-1-xs。运用real-timepcr和半定量westernblot分别检测xiap和survivin的mrna和蛋白的表达情况，以细胞计数法及克隆形成实验检测细胞增殖能力，caspase-3/7试剂盒及流式细胞仪检测细胞凋亡，mtt法检测细胞对gem的化疗敏感性。结果：成功建立了xiap和/或survivin表达稳定抑制的胰腺癌细胞株panc-1。xiap和survivin同时稳定抑制后，panc-1的增殖能力显著受到抑制，panc-1-xs组的克隆形成率为10.12%±1.33%，显著低于对照组panc-1-xncsnc组(96.61%±7.89%)和panc-1组(100.28%±8.97%,p<0.05)。用0.5mg/lgem处理24h后，panc-1-xs组的caspase-3/7相对活性明显升高至15.02±0.57，显著高于panc-1组与panc-1-xncsnc组（分别为8.87±0.19和9.05±0.23，p<0.05）；panc-1-xs组的细胞凋亡率为24.09%±2.75%，显著高于对照组panc-1-xncsnc及panc-1组（分别为12.09%±1.97%和12.06%±1.22%，p<0.05）。panc-1-xs组的ic50值为(0.47±0.04)mg/l，显著低于对照组panc-1-xncsnc的(2.18±0.13)mg/l及panc-1组的(2.13±0.18)mg/l(p<0.05)，对gem的化疗敏感性显著增强。进一步检测显示，panc-1-xs组的ic50值为(0.47±0.04)mg/l，均显著低于panc-1-x组的(0.76±0.07)mg/l和panc-1-s组的(0.87±0.09)mg/l(p<0.05)。结论：同时稳定抑制胰腺癌细胞株panc-1中xiap和survivin的表达，能显著抑制panc-1细胞增殖能力，增强其gem化疗敏感性，并明显优于xiap或survivin表达单独抑制的策略。