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应用与环境生物学报 2007
gsh1基因的克隆及其在巴斯德毕赤氏酵母中的表达, PP. 257-260 Keywords: 关键词gsh1,巴斯德毕赤氏酵母,克隆,表达 Abstract: 摘要利用pcr技术克隆了来源于saccharomycescerevisiaealj036的γ？l？谷氨酰？l？半胱氨酸合成酶(γ？glutamyl？cysteinesynthetase)编码基因gsh1，连接多拷贝表达载体pgapza，转化pichiapastorisx？33，构建了重组菌p.pastorisx？33(pgapza？gsh1)；在高浓度zeocin平板上筛选多拷贝阳性转化子，并通过pcr进行了验证.对阳性转化子的γ？l？谷氨酰？l？半胱氨酸合成酶酶活力进行了测定，结果显示，重组酵母的γ？l？谷氨酰？l？半胱氨酸合成酶的酶活是宿主菌的3.0倍，在液体yepd中重组菌gsh的产量为42.2mg/l，是宿主菌的1.6倍.图7表1参10
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