海栖热袍菌极耐高温木聚糖酶b的化学修饰和活性中心

摘要分别用nbs、dtnb、phenylgloxal、pmsf、wrk等对海栖热袍菌极耐高温木聚糖酶b进行化学修饰.结果表明，酶蛋白分子上的色氨酸和谷氨酸（或天冬氨酸）残基是维持酶活性的必需基团.半胱氨酸、精氨酸、丝氨酸及组氨酸残基均不处于酶活性中心.而修饰酶热稳定性测定结果是，羧基对稳定性起重要作用.通过测定修饰酶的假一级常数，得到一个色氨酸残基和一个谷氨酸（或天冬氨酸）残基为极耐高温木聚糖酶b所必需.在加入少量底物后，极耐高温木聚糖酶b的最大荧光发射峰从天然状态下的336nm处红移至345nm，且峰强度下降.这表明色氨酸残基位于酶蛋白表面.图7表2参18