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OALib Journal期刊
ISSN: 2333-9721
费用：99美元
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青海弧菌lux基因在大肠杆菌中的异源表达
DOI: 10.3724/SP.J.1145.2014.06018, PP. 1086-1090
Keywords: lux基因,青海弧菌,重组菌,发光,癸醛,异源表达
Abstract:
研究淡水发光菌青海弧菌vibrioqinghaiensisq67的luxcdabe发光基因在大肠杆菌中的表达，并测定其对相关因素的耐受性，为其应用条件的筛选提供有利依据.对构建好的重组菌进行酶切验证筛选出发光重组菌，将其在含氯霉素的液体lb培养基中以异丙基硫代-β-d-半乳糖苷（iptg）为诱导剂，对发光特性的表达条件进行研究，考察重组菌生长与发光的对应关系，癸醛、ph、温度和iptg对发光的影响，以及重组菌在室温下的稳定性测定.结果显示，重组菌发光强度随菌体生长先升后降，在对数生长后期发光强度达到最大；当癸醛浓度（0.1-3.0μl/ml）、ph（3.0-11.0）、温度（25-43℃）和iptg（0.05-0.35mg/ml）从小到大变化时，重组菌的光强均呈现先增后减趋势；各影响因素分别为癸醛浓度1.0μl/ml，ph6.0，温度37℃，iptg浓度0.10mg/ml时，重组菌发光最强；发光在10min内达到最大值后迅速下降，后来平缓波动趋于稳定，3h内光强仍在测量范围内.本研究表明，青海弧菌luxcdabe基因在大肠杆菌中能很好表达并维持发光，重组菌对环境的耐受性为lux基因作为发光标记基因提供了应用范围参考.
| [1] | 1朱文杰,汪杰.发光细菌一新种――青海弧菌[j].海洋与湖沼,1994,25(3):273-279[zhuwj,wangj.anewluminescentbacteriaspecies-vibriooinghaiensis[j].oceanoletlimnolsin,1994,25(3):273-
|
| [2] | 2dunlappv,kita-tsukamotok.luminousbacteria.prokaryotes[m],2006,2:863-892
|
| [3] | 3closed,xut,smartta,rogersa,crossleyr,prices,ripps,saylerg.theevolutionofthebacterialluciferasegenecassette(lux)asareal-timebioreporter[j].sensors,2012,12(1):732-752
|
| [4] | 4马晓妍,闫志刚,刘永军,王晓昌.污水的青海弧菌q67生物毒性检测及影响因素分析[j].环境科学,2011(6):1632-1637[maxy,yanzg,liuyj,wangxc.detectionofwastewaterecotoxicityusingvibrioqinghaiensissp.q67anditsimpactfactorsanalysis[j].environsci,2011(6):1632-
|
| [5] | 5朱文杰,郑天凌,李伟民.发光细菌与环境毒性检测[m].北京:中国轻工业出版社,2009[zhuwj,zhengtl,liwm.luminousbacteriaandenvironmentalmonitoring[m].beijing:chineselightindustrypress,
|
| [6] | 6maxy,wangxc,liuyj.cytotoxicityandgenotoxicityevaluationofurbansurfacewatersusingfreshwaterluminescentbacteriavibrio-qinghaiensissp.q67andviciafabaroottip[j].jenvironscichina,2012,24(10):1861-1866
|
| [7] | 7mam,tongz,wangz,zhuw.acutetoxicitybioassayusingthefreshwaterluminescentbacteriumvibrio-qinghaiensissp.nov.q67[j].bullenvironconttox,1999,62(3):247-253
|
| [8] | 19吴泳标,张国霞,许玫英,张家强,孙国萍.发光细菌在水环境生物毒性检测中应用的研究进展[j].微生物学通报,2010,37(8):1222-1226[wuyb,zhanggx,xumy,zhangjq.advanceintheapplicationofluminescentbacteriaoninspectingecotoxisityinwater[j].microbiolchin,2010,37(8):1222-
|
| [9] | 8woutersenm,belkins,brouwerb,vanwezelap,heringamb.areluminescentbacteriasuitableforonlinedetectionandmonitoringoftoxiccompoundsindrinkingwateranditssources?[j].analbioanalchem,2011,400(4):915-929
|
| [10] | 9凌云,赵渝,徐亚同,朱文杰.发光细菌法在食品安全性检测中的应用[j].食品与生物技术学报,2005,24(6):106-110[lingy,zhaoy,xuyt,zhuwj.applicationofphotobacteriainfoodsafetyinspection[j].jfoodscibiotechnol,2005,24(6):106-
|
| [11] | 10茆灿泉,杨树德.发光细菌lux报告基因系统的评价及应用[j].微生物学通报,2000,27(4):297-299
|
| [12] | 11夏铁骑,常慧萍.发光细菌lux基因系统的遗传学研究及应用[j].濮阳职业技术学院学报,2008,21(4):1-3
|
| [13] | 12sambrookj,russelldw.molecularcloning:alaboratorymanual[m].sciencepress,2002
|
| [14] | 13陈浮,刘树深,段欣甜.青海弧菌荧光素酶蛋白三维结构的分子模拟研究[j].化学学报,2013,71:1035-1040[chenf,liuss,duanxt.molecularmodelingstudyonthethree-dimensionalstructureoftheluciferaseproteininvibrio-qinghaiensissp.-q67[j].actachimsin,2013,71:1035-
|
| [15] | 14kosinskimj,rinasu,baileyje.isopropyl-β-d-thiogalactopyranosideinfluencesthemetabolismofescherichiacoli[j].applmicrobiolbiotechnol,1992,36(6):782-784
|
| [16] | 15郑敬民,赵曙霞.环境因子对青海弧菌生长和发光的影响[j].华东师范大学学报:自然科学版,1999(1):98-102[zhengjm,zhaosx.theinfluenceofenvironmentalfactorsonthegrowthandluminescenceofvibrio-qinghaiensissp.nov[j].jeastchinanormuniv:natsci,1999(1):98-
|
| [17] | 16kimuran.metagenomicapproachestounderstandingphylogeneticdiversityinquorumsensing[j].virulence,2014,5(3):433-442
|
| [18] | 17linly-c,meighenea.bacterialbioluminescence[eb/ol].2009-01-25,http://www.photobiology.info/lin.html
|
| [19] | 18曾军,黄巧云,陈雯莉.基于luxab标记菌株的发光定量分析及其在镉毒性检测方面的应用[j].应用与环境生物学报,2007,13(1):135-139[zengj,huangqy,chenwl.quantativeanalysisofluminescencebasedonluxab-markedstrainanditsapplicationindetectionofcadmiumtoxicity[j].chinjapplenvironbiol,2007,13(1):135-
|
| [20] | 20李伟民,孙峰,米琴,景奉香,朱文杰.采用生物发光检测法进行ames试验的研究[j].应用与环境生物学报,2006,12(5):722-725[liwm,sunf,miq,jingfx,zhuwj.applicationofbioluminescenceassaytoimprovetheamestest[j].chinjapplenvironbiol,2006,12(5):722-
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