%0 Journal Article %T 青海弧菌lux基因在大肠杆菌中的异源表达 %A 张莉丽 %A 丁武 %A 王妍稳 %A 李? %J 应用与环境生物学报 %P 1086-1090 %D 2014 %R 10.3724/SP.J.1145.2014.06018 %X 研究淡水发光菌青海弧菌vibrioqinghaiensisq67的luxcdabe发光基因在大肠杆菌中的表达,并测定其对相关因素的耐受性,为其应用条件的筛选提供有利依据.对构建好的重组菌进行酶切验证筛选出发光重组菌,将其在含氯霉素的液体lb培养基中以异丙基硫代-β-d-半乳糖苷(iptg)为诱导剂,对发光特性的表达条件进行研究,考察重组菌生长与发光的对应关系,癸醛、ph、温度和iptg对发光的影响,以及重组菌在室温下的稳定性测定.结果显示,重组菌发光强度随菌体生长先升后降,在对数生长后期发光强度达到最大;当癸醛浓度(0.1-3.0μl/ml)、ph(3.0-11.0)、温度(25-43℃)和iptg(0.05-0.35mg/ml)从小到大变化时,重组菌的光强均呈现先增后减趋势;各影响因素分别为癸醛浓度1.0μl/ml,ph6.0,温度37℃,iptg浓度0.10mg/ml时,重组菌发光最强;发光在10min内达到最大值后迅速下降,后来平缓波动趋于稳定,3h内光强仍在测量范围内.本研究表明,青海弧菌luxcdabe基因在大肠杆菌中能很好表达并维持发光,重组菌对环境的耐受性为lux基因作为发光标记基因提供了应用范围参考. %K lux基因 %K 青海弧菌 %K 重组菌 %K 发光 %K 癸醛 %K 异源表达 %U http://www.cibj.com/oa/DArticle.aspx?type=view&id=201406018