苜蓿根瘤菌乙酰-coa合成酶的过量表达、纯化及特性

摘要pcr扩增了苜蓿根瘤菌乙酰辅酶a合成酶编码基因(acsa1)，克隆到连接-非依赖型载体pet30lic；在e.colibl21(de3)plyss中得到了有效表达，表达需iptg的诱导，诱导3h达到酶活高峰.采用his？bind柱层析对acs进行了纯化，纯化的酶蛋白经sds-page呈单一浓带，分子量约72000，具较高的酶活，是无细胞提取液的12.7倍.酶动力学分析显示，vmax、km分别为（413.6±11.7）mmoll－1和（5.8±0.6）mmoll－1.图4表2参8