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ISSN: 2333-9721
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人内皮抑素基因的克隆、表达、纯化及活性测定

, PP. 416-418

Keywords: 人内皮抑素,基因克隆,表达,纯化,抗血管生成作用

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Abstract:

目的获得有生物学活性的人内皮抑素蛋白。方法用反转录多聚酶链反应(rt-pcr)得到人内皮抑素编码区基因,连接pgem-t载体,测序确认,定向克隆入pbv220表达载体,转化大肠杆菌dh5α进行表达、纯化及活性测定。结果经测序分析证实,所获得的552bp基因片段序列属于人内皮抑素基因,构建表达载体在大肠杆菌中表达,经sds-page分析,出现特异性蛋白质条带,并具有生物学活性。结论人内皮抑素基因在大肠杆菌中获得非融合表达,表达蛋白能够抑制人脐静脉血管内皮细胞(ecv304)的增殖,为应用内皮抑素进行抗血管生成治疗奠定了基础。

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