大黄欧文菌中蔗糖异构酶基因的克隆表达及应用

以大黄欧文菌(erwiniarhapontici)nx-5基因组dna为模板,pcr扩增得到编码蔗糖异构酶（siase）的基因palⅰ,构建克隆载体puc18-palⅰ。经测序正确后,将palⅰ亚克隆至表达载体pet-22b(+)上，并在e.colibl21(de3)中成功表达相对分子质量约为66000的可溶性蛋白。通过ni-nta柱对表达产物进行纯化,纯酶的比活为40u/mg。转化条件研究表明：重组菌能够高效转化质量分数为50%的蔗糖溶液，转化液中异麦芽酮糖得率为85%。