OALib Journal期刊
ISSN: 2333-9721
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油茶srap-pcr反应体系的建立
DOI: 10.3969/j.jssn.1000-2006.2011.05.025, PP. 112-116
Keywords: 油茶,srap,反应体系,正交设计
Abstract:
以油茶品种大别山2号和赣兴46为试验材料,利用me5em8正反向引物组合进行了srap-pcr反应体系的l??9?(3??4?)正交试验,采用正交设计直观分析及方差分析对影响srap反应的?taq?聚合酶、mg??2+?、dntp和引物浓度进行分析,并对模板dna浓度进行了单因素试验分析。结果表明,油茶srap-pcr20μl反应体系的最佳组合为:?taq?聚合酶1.20μmol/min、mg??2+?浓度1?25mmol/l、dntp浓度0.15mmol/l、primer浓度0.60μmol/l、模板dna含量60ng,并含有?2μl??10×buffer?(mg??2+?free)。各因素对油茶srap-pcr反应的影响大小依次为:dntp、mg??2+?、?taq?聚合酶、primer。
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