水疱性口炎病毒n基因原核表达载体的构建及表达

针对水疱性口炎病毒(vsv)n基因设计特异性引物，在引物中分别加入ecori和xhoi酶切位点。rt-pcr扩增后得到目的基因，将其克隆到表达载体pet30c，连接产物转化于dh5a菌株，在含kan+的平板上37℃培养24h，然后挑取白色菌落，鉴定为阳性者，转化于bl21菌株，再经异丙基硫代-β-d-半乳糖苷(iptg)诱导获得高效表达。表达融合蛋白分子质量为53ku(目的蛋白大约47ku)，同预期蛋白大小相近。westernblot检测表明，其能与本病毒阳性血清发生特异性反应，表达蛋白有望成为有价值的vsv诊断抗原。