%0 Journal Article %T 水疱性口炎病毒n基因原核表达载体的构建及表达 %A 郑增忍? %A 王海霞? %A 龚振华? %J 西北农林科技大学学报(自然科学版) %P 5-8 %D 2004 %X 针对水疱性口炎病毒(vsv)n基因设计特异性引物,在引物中分别加入ecori和xhoi酶切位点。rt-pcr扩增后得到目的基因,将其克隆到表达载体pet30c,连接产物转化于dh5a菌株,在含kan+的平板上37℃培养24h,然后挑取白色菌落,鉴定为阳性者,转化于bl21菌株,再经异丙基硫代-β-d-半乳糖苷(iptg)诱导获得高效表达。表达融合蛋白分子质量为53ku(目的蛋白大约47ku),同预期蛋白大小相近。westernblot检测表明,其能与本病毒阳性血清发生特异性反应,表达蛋白有望成为有价值的vsv诊断抗原。 %K 水疱性口炎病毒 %K n基因 %K 原核表达载体 %U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20040502&flag=1