小反刍兽疫病毒细胞膜受体的鉴定

【目的】对小反刍兽疫病毒（pestedespetitsruminantsvirus，pprv）h蛋白胞外区（th）细胞膜受体进行鉴定，为pprv致病机制的研究奠定基础。【方法】克隆pprvh基因胞外区（th），在毕赤酵母(pichiapastoris)中进行真核表达，纯化后免疫家兔，获得兔抗pprvth蛋白特异性抗体；提取山羊外周血淋巴细胞膜蛋白，经sds-page检测后，湿转印法转印至nc膜，分别利用纯化的重组th蛋白和pprv进行病毒铺覆蛋白结合试验（vopba），对受体进行鉴定。【结果】成功克隆了1653bp的pprvth基因，构建其重组酵母表达质粒ppic9k-th，诱导表达后获得了60ku目的蛋白。重组th蛋白免疫家兔后获得了效价为1∶200的抗血清。westernblotting分析发现，该重组蛋白可与pprv多克隆抗体发生特异性反应，山羊外周血淋巴细胞膜蛋白上有2个与pprv和重组th蛋白结合的蛋白带，分子质量约为38和100ku。【结论】从山羊外周血淋巴细胞膜蛋白上鉴定到了2种与pprv结合的蛋白组分，其特性有待于进一步研究。