%0 Journal Article %T 小反刍兽疫病毒细胞膜受体的鉴定 %A 蒙学莲? %A 窦永喜? %A 翟军军? %J 西北农林科技大学学报(自然科学版) %D 2012 %X 【目的】对小反刍兽疫病毒(pestedespetitsruminantsvirus,pprv)h蛋白胞外区(th)细胞膜受体进行鉴定,为pprv致病机制的研究奠定基础。【方法】克隆pprvh基因胞外区(th),在毕赤酵母(pichiapastoris)中进行真核表达,纯化后免疫家兔,获得兔抗pprvth蛋白特异性抗体;提取山羊外周血淋巴细胞膜蛋白,经sds-page检测后,湿转印法转印至nc膜,分别利用纯化的重组th蛋白和pprv进行病毒铺覆蛋白结合试验(vopba),对受体进行鉴定。【结果】成功克隆了1653bp的pprvth基因,构建其重组酵母表达质粒ppic9k-th,诱导表达后获得了60ku目的蛋白。重组th蛋白免疫家兔后获得了效价为1∶200的抗血清。westernblotting分析发现,该重组蛋白可与pprv多克隆抗体发生特异性反应,山羊外周血淋巴细胞膜蛋白上有2个与pprv和重组th蛋白结合的蛋白带,分子质量约为38和100ku。【结论】从山羊外周血淋巴细胞膜蛋白上鉴定到了2种与pprv结合的蛋白组分,其特性有待于进一步研究。 %K 小反刍兽疫病毒 %K 病毒受体 %K 病毒铺覆蛋白结合试验(vopba) %U http://www.xnxbz.net/xbnlkjdxzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20120903&flag=1