呼吸道合胞病毒重组蛋白候选疫苗的质粒构建、表达及免疫原性和保护性研究

pcr扩增呼吸道合胞病毒（respiratorysyncytialvirus，rsv）m2蛋白的cd8＋t细胞表位f/m2:81-95和rsv-g蛋白的b细胞表位片段g:125～225（简称g1），以一个linker连接，插入质粒pet-dsba中构建原核表达重组质粒,转染e.colibl21(de3)后成功表达了融合蛋白dsba-g1-linker-f/m2:81-95（简称d-g1lf/m2），western-blot结果表明该融合蛋白是rsv特异性的，采用ni+螯合亲和层析法纯化变性的包涵体溶液，经梯度透析法复性，用该蛋白免疫balb/c小鼠，结果表明被免疫小鼠肺部及血清中产生了高滴度的抗d-g1lf/m2及抗rsvigg抗体和中和抗体，同时还诱导产生了rsv特异性的ctl应答；igg的亚型igg1/igg2a的比值为2.66；用rsv攻击免疫后的小鼠，病毒滴定法检测肺部rsv滴度，结果表明d-g1lf/m2对小鼠肺部具有保护作用。