%0 Journal Article %T 呼吸道合胞病毒重组蛋白候选疫苗的质粒构建、表达及免疫原性和保护性研究 %A 曾瑞红 龚伟 方学平 张振亚 梅兴国* %J 生物工程学报 %D 2005 %X pcr扩增呼吸道合胞病毒(respiratorysyncytialvirus,rsv)m2蛋白的cd8+t细胞表位f/m2:81-95和rsv-g蛋白的b细胞表位片段g:125~225(简称g1),以一个linker连接,插入质粒pet-dsba中构建原核表达重组质粒,转染e.colibl21(de3)后成功表达了融合蛋白dsba-g1-linker-f/m2:81-95(简称d-g1lf/m2),western-blot结果表明该融合蛋白是rsv特异性的,采用ni+螯合亲和层析法纯化变性的包涵体溶液,经梯度透析法复性,用该蛋白免疫balb/c小鼠,结果表明被免疫小鼠肺部及血清中产生了高滴度的抗d-g1lf/m2及抗rsvigg抗体和中和抗体,同时还诱导产生了rsv特异性的ctl应答;igg的亚型igg1/igg2a的比值为2.66;用rsv攻击免疫后的小鼠,病毒滴定法检测肺部rsv滴度,结果表明d-g1lf/m2对小鼠肺部具有保护作用。 %K 呼吸道合胞病毒(rsv) %K 融合蛋白d-g1lf/m2 %K 中和抗体 %K ctl %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=05040534&flag=1