大腹园蛛次壶腹腺丝的表达

基于大腹园蛛次壶腹腺丝minorampullatespidroin全长编码基因最新报道，研究了该基因的表达。利用pcr扩增该基因重复区一段长1348bp的片段p1，融合his-tag标签，构建酵母表达载体，在毕赤酵母菌gs115进行表达。同时构建大肠杆菌表达载体，在大肠杆菌bl21(de3)中进行表达。sds-page和westernblotting检测结果表明，p1在两种表达系统中均可实现表达。研究结果显示：p1在gs115中的表达经优化后产量、产率有较大提高，且远高于bl21(de3)中的表达，相应的纯化效率gs115也远高于对照bl21(de3)的表达。研究表明酵母表达系统更适合重复度高、且富含gly/ala的天然蛛丝蛋白基因的表达，为表达全长天然misp编码序列提供前期实验基础，也为大规模蛛丝蛋白的重组表达建立了平台。