%0 Journal Article %T 大腹园蛛次壶腹腺丝的表达 %A 杨子江? %A 陈格飞? %A 孟清? %J 生物工程学报 %P 1323-1331 %D 2013 %X 基于大腹园蛛次壶腹腺丝minorampullatespidroin全长编码基因最新报道,研究了该基因的表达。利用pcr扩增该基因重复区一段长1348bp的片段p1,融合his-tag标签,构建酵母表达载体,在毕赤酵母菌gs115进行表达。同时构建大肠杆菌表达载体,在大肠杆菌bl21(de3)中进行表达。sds-page和westernblotting检测结果表明,p1在两种表达系统中均可实现表达。研究结果显示:p1在gs115中的表达经优化后产量、产率有较大提高,且远高于bl21(de3)中的表达,相应的纯化效率gs115也远高于对照bl21(de3)的表达。研究表明酵母表达系统更适合重复度高、且富含gly/ala的天然蛛丝蛋白基因的表达,为表达全长天然misp编码序列提供前期实验基础,也为大规模蛛丝蛋白的重组表达建立了平台。 %K 次壶腹腺丝蛋白 %K 毕赤酵母表达系统 %K 大肠杆菌表达系统 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc13001323&flag=1