人乳头瘤病毒16型l2e7融合蛋白的优化表达、制备及其对肿瘤生长的抑制作用

为提高人乳头瘤病毒(hpv)16型治疗性融合蛋白疫苗hpv16l2e7在大肠杆菌中的表达量，根据大肠杆菌偏爱密码子，对hpv16l2e7基因进行密码子优化，优化后的基因分别插入到pgex-5x-1、pqe30和pet41a表达载体中，转化jm109、jm109(de3)和bl21(de3)表达菌，筛选出高表达菌株pet41a-hpv16sl2e7/bl21(de3)，目的蛋白从占全菌蛋白的10%以下提高到约28%，优化接种量、iptg浓度、诱导温度和诱导时间，获得最佳表达条件；通过15l发酵罐发酵，spsepharosefastflow、qsepharosefastflow和superdex200pg纯化及复性hpv16l2e7融合蛋白，制备的融合蛋白纯度可达95%以上，经sds-page、westernblotting鉴定证实，制备的hpv16l2e7蛋白加cpg佐剂对小鼠移植瘤生长具有明显的抑制作用，有75%(6/8)的小鼠不成瘤，为后续的疫苗产业化奠定基础。