%0 Journal Article %T 人乳头瘤病毒16型l2e7融合蛋白的优化表达、制备及其对肿瘤生长的抑制作用 %A 姜云水? %A 李剑波? %A 高孟? %A 任皎? %A 金素凤? %A 陈刚? %A 吴洁? %A 庄昉成? %A 田厚文? %J 生物工程学报 %P 566-576 %D 2015 %R 10.13345/j.cjb.140390 %X 为提高人乳头瘤病毒(hpv)16型治疗性融合蛋白疫苗hpv16l2e7在大肠杆菌中的表达量,根据大肠杆菌偏爱密码子,对hpv16l2e7基因进行密码子优化,优化后的基因分别插入到pgex-5x-1、pqe30和pet41a表达载体中,转化jm109、jm109(de3)和bl21(de3)表达菌,筛选出高表达菌株pet41a-hpv16sl2e7/bl21(de3),目的蛋白从占全菌蛋白的10%以下提高到约28%,优化接种量、iptg浓度、诱导温度和诱导时间,获得最佳表达条件;通过15l发酵罐发酵,spsepharosefastflow、qsepharosefastflow和superdex200pg纯化及复性hpv16l2e7融合蛋白,制备的融合蛋白纯度可达95%以上,经sds-page、westernblotting鉴定证实,制备的hpv16l2e7蛋白加cpg佐剂对小鼠移植瘤生长具有明显的抑制作用,有75%(6/8)的小鼠不成瘤,为后续的疫苗产业化奠定基础。 %K 人乳头瘤病毒16型 %K 优化表达 %K 发酵 %K 纯化 %K 宫颈癌 %K 疫苗 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc15040566&flag=1