armillariellatabescensejly2098β-甘露聚糖酶的克隆、表达及性质分析

本研究利用rt-pcr和race技术从armillariellatabescensejly2098(一种食用真菌)中克隆出了β-甘露聚糖酶的全长cdna,构建到ppiczaa载体上,并在毕赤酵母gs115中表达了含his标签的β-甘露聚糖酶(re-atman47)。该酶的全长cdna共1481bp,编码445个氨基酸,序列分析表明该序列除含有β-甘露聚糖酶结构域外,还含有cbd和ghf5的结构域,因此可被归为糖苷水解酶家族5的一个新成员。诱导培养72h时重组酶活可达到1.067u/ml,蛋白含量为440mg/l。重组酶的最适反应温度为60°c,在30°c~65°c比较稳定;酶促最适ph为5.5、4.5~7.0之间比较稳定。这是首次关于armillariella.tabescensejly2098产β-甘露聚糖酶的报道,得到了一个有较好热稳定性、ph稳定性和生物安全性的糖苷水解酶,将在饲料、食品、药物生产等方面有广泛的应用。