酿酒酵母产苹果酸的还原tca路径构建及发酵调控

苹果酸广泛应用于食品、化工行业。文中通过在酿酒酵母内敲除丙酮酸脱羧酶pdc1，并通过构建胞质内还原tca的路径，即超表达丙酮酸羧化酶和苹果酸脱氢酶，成功地实现了苹果酸的生产。在野生型菌株中基本检测不到苹果酸的生成，而在工程菌株，苹果酸发酵浓度达到了45mmol/l，同时副产物乙醇的产量也降低了18%。进一步通过发酵调控提高第二信使ca2+的浓度使苹果酸的产量提高了7%，在此基础上提高丙酮酸羧化酶的辅酶生物素浓度，使苹果酸的产量达到52.5mmol/l，较原始菌株提高了16%。