苏云金杆菌辅助蛋白p20对杀虫晶体蛋白cry1ab表达的影响

苏云金杆菌(bacillusthuringiensis,简称bt)杀虫晶体蛋白cry1ab因其c半端缺少了一段含4个半胱氨酸的氨基酸序列而导致蛋白的不稳定，报道苏云金杆菌辅助蛋白p20帮助cry1ab蛋白的表达及晶体的形成。利用穿梭载体pht3101构建3个表达质粒，即pt1b、pp1b和pdp1b，3个质粒都含有cry1ab基因，不同在于pt1b没有p20基因，pp1b含有p20全基因，而pdp1b不仅含有p20全基因，且在p20基因前插入cry1a?启动子。分别将这3个表达质粒经电转化到苏云金杆菌晶体缺陷型菌株cryb中，获得转化菌株t1b、p1b和dp1b。westernblot表明cry1ab基因在这3株菌中均表达了130kd的蛋白，部分降解为大约60kd的蛋白。蛋白定量分析显示，3株菌130kd蛋白量的比为1∶1.4∶1.5，降解后的60kd蛋白量的比为1∶1.1∶1.6，cry1ab蛋白总量的比为1∶1∶2∶1.6。镜检发现，cry1ab在3株菌中都形成典型的菱形晶体，其晶体大小为t1bhelicoverpaarmigera）均具有明显的杀虫活性，三者的lc50差异不显著。研究表明，p20对cry1ab基因的表达和晶体形成均有帮助，p20表达量的多少可能是导致cry1ab蛋白最终产量有所不同的因素。