%0 Journal Article %T 苏云金杆菌辅助蛋白p20对杀虫晶体蛋白cry1ab表达的影响 %A 汤慕瑾 袁美妗 陈建武 师永霞 曾少灵 余健秀 庞义* %J 生物工程学报 %D 2003 %X 苏云金杆菌(bacillusthuringiensis,简称bt)杀虫晶体蛋白cry1ab因其c半端缺少了一段含4个半胱氨酸的氨基酸序列而导致蛋白的不稳定,报道苏云金杆菌辅助蛋白p20帮助cry1ab蛋白的表达及晶体的形成。利用穿梭载体pht3101构建3个表达质粒,即pt1b、pp1b和pdp1b,3个质粒都含有cry1ab基因,不同在于pt1b没有p20基因,pp1b含有p20全基因,而pdp1b不仅含有p20全基因,且在p20基因前插入cry1a?启动子。分别将这3个表达质粒经电转化到苏云金杆菌晶体缺陷型菌株cryb中,获得转化菌株t1b、p1b和dp1b。westernblot表明cry1ab基因在这3株菌中均表达了130kd的蛋白,部分降解为大约60kd的蛋白。蛋白定量分析显示,3株菌130kd蛋白量的比为1∶1.4∶1.5,降解后的60kd蛋白量的比为1∶1.1∶1.6,cry1ab蛋白总量的比为1∶1∶2∶1.6。镜检发现,cry1ab在3株菌中都形成典型的菱形晶体,其晶体大小为t1bhelicoverpaarmigera)均具有明显的杀虫活性,三者的lc50差异不显著。研究表明,p20对cry1ab基因的表达和晶体形成均有帮助,p20表达量的多少可能是导致cry1ab蛋白最终产量有所不同的因素。 %K 苏云金杆菌 %K p20 %K 基因 %K cry1ab基因 %K 表达 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=03050566&flag=1