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生物工程学报 2002
用克隆池pcr法筛选小麦簇毛麦易位系6vs/6al基因组tac文库获得抗病基因候选克隆Keywords: 小麦,簇毛麦易位系,小麦基因组tac文库,克隆池pcr筛选,抗病候选基因 Abstract: 用根据抗病基因保守区设计的一对简并性引物，从小麦簇毛麦易位系6vs/6alcdna中pcr扩增获得一个具有抗病基因核苷酸结合位点（nucleotidebindingsite,nbs）结构特点的dna片段克隆n7。从小麦簇毛麦易位系6vs/6al基因组tac（transformationcompetentartificialchromosome,tac）文库的22块96孔板提取所有2112个克隆池（每个池含约1000个克隆）的质粒，再根据n7的核苷酸序列设计一对特异引物，用克隆池pcr（pooledpcr）法经分级筛选从文库中获得一个阳性克隆。以n7为探针，通过southern杂交证实了该tac克隆为真正含有抗病候选基因的克隆。研究结果表明克隆池pcr法对克隆数目巨大的基因组文库的筛选很有效。
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