%0 Journal Article %T 用克隆池pcr法筛选小麦簇毛麦易位系6vs/6al基因组tac文库获得抗病基因候选克隆 %A 秦跟基 陈佩度* 刘耀光 方玉达 刘大钧 %J 生物工程学报 %D 2002 %X 用根据抗病基因保守区设计的一对简并性引物,从小麦簇毛麦易位系6vs/6alcdna中pcr扩增获得一个具有抗病基因核苷酸结合位点(nucleotidebindingsite,nbs)结构特点的dna片段克隆n7。从小麦簇毛麦易位系6vs/6al基因组tac(transformationcompetentartificialchromosome,tac)文库的22块96孔板提取所有2112个克隆池(每个池含约1000个克隆)的质粒,再根据n7的核苷酸序列设计一对特异引物,用克隆池pcr(pooledpcr)法经分级筛选从文库中获得一个阳性克隆。以n7为探针,通过southern杂交证实了该tac克隆为真正含有抗病候选基因的克隆。研究结果表明克隆池pcr法对克隆数目巨大的基因组文库的筛选很有效。 %K 小麦 %K 簇毛麦易位系 %K 小麦基因组tac文库 %K 克隆池pcr筛选 %K 抗病候选基因 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=02030313&flag=1