玫瑰黄链霉菌men-myco-93-63nsdamgh基因阻断突变株的构建

为研究从玫瑰黄链霉菌men-myco-93-63中克隆到的，与天蓝色链霉菌m145中的一个重要负调控基因nsda基因同源的nsdamgh基因的功能，本文构建了nsdamgh基因破坏型重组质粒psrna2500(pkc1139::1.5kbnsdamgh::1.0kbkmr)，转化et12567(puz8002)获得接合转移供体菌et12567(puz8002，psrna2500)，通过接合转移将重组质粒导入玫瑰黄链霉菌men-myco-93-63中。在高温和抗生素双重筛选压力下，筛选得到表型为amskmr的nsdamgh基因阻断突变株，通过pcr、dotbloting和southernblotting验证了突变株中的nsdamgh基因已被正确阻断。与出发菌株相比，突变株在摇瓶水平上对棉花黄萎病菌的抑制能力提高了一倍。