%0 Journal Article %T 玫瑰黄链霉菌men-myco-93-63nsdamgh基因阻断突变株的构建 %A 沈凤英? %A 吴伟刚? %A 张艳杰? %A 寇宏达? %A 冀红柳? %A 李亚宁? %A 刘大群? %J 生物工程学报 %P 1741-1752 %D 2015 %R 10.13345/j.cjb.150053 %X 为研究从玫瑰黄链霉菌men-myco-93-63中克隆到的,与天蓝色链霉菌m145中的一个重要负调控基因nsda基因同源的nsdamgh基因的功能,本文构建了nsdamgh基因破坏型重组质粒psrna2500(pkc1139::1.5kbnsdamgh::1.0kbkmr),转化et12567(puz8002)获得接合转移供体菌et12567(puz8002,psrna2500),通过接合转移将重组质粒导入玫瑰黄链霉菌men-myco-93-63中。在高温和抗生素双重筛选压力下,筛选得到表型为amskmr的nsdamgh基因阻断突变株,通过pcr、dotbloting和southernblotting验证了突变株中的nsdamgh基因已被正确阻断。与出发菌株相比,突变株在摇瓶水平上对棉花黄萎病菌的抑制能力提高了一倍。 %K 玫瑰黄链霉菌men-myco-93-63 %K pkc1139 %K nsda基因 %K 基因阻断 %K 同源重组 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc15121741&flag=1