一种低温表达型t载体及其应用

在现代生物学和生物技术研究中，通过基因重组表达获得目标蛋白已成为常规技术。因其培养简单、操作方便、遗传背景清楚、克隆表达技术成熟，大肠杆菌表达系统通常是人们表达重组蛋白的首选。但是在常规温度下进行基因的重组表达，动、植物和常温微生物的基因产物多数在数小时内变性沉淀；还有一些重组蛋白对宿主具有细胞毒性，难以得到重组表达。因此，我们构建了1种新型t载体——pexc-t；它结合ta克隆技术和低温诱导表达功能，具有表达水平高、操作方便、目标蛋白得到分子伴侣保护和低温保存等特点。采用构建和优化的pexc载体，p1抗原蛋白、溶血素plo两种不稳定性蛋白在pexc中都实现了高效的可溶性表达。低温表达系统pexc的建立和发展为蛋白质的结构与功能的研究，以及抗原和药用蛋白的制备提供了便利的途径。