%0 Journal Article %T 一种低温表达型t载体及其应用 %A 何燕斌? %A 齐亚坤? %A 黄霖霆? %A 周蓉? %A 邵蔚蓝? %J 生物工程学报 %P 1773-1783 %D 2015 %R 10.13345/j.cjb.150034 %X 在现代生物学和生物技术研究中,通过基因重组表达获得目标蛋白已成为常规技术。因其培养简单、操作方便、遗传背景清楚、克隆表达技术成熟,大肠杆菌表达系统通常是人们表达重组蛋白的首选。但是在常规温度下进行基因的重组表达,动、植物和常温微生物的基因产物多数在数小时内变性沉淀;还有一些重组蛋白对宿主具有细胞毒性,难以得到重组表达。因此,我们构建了1种新型t载体——pexc-t;它结合ta克隆技术和低温诱导表达功能,具有表达水平高、操作方便、目标蛋白得到分子伴侣保护和低温保存等特点。采用构建和优化的pexc载体,p1抗原蛋白、溶血素plo两种不稳定性蛋白在pexc中都实现了高效的可溶性表达。低温表达系统pexc的建立和发展为蛋白质的结构与功能的研究,以及抗原和药用蛋白的制备提供了便利的途径。 %K 大肠杆菌 %K 表达系统 %K 低温诱导 %K 可溶性蛋白 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc15121773&flag=1