代谢工程方法改造大肠杆菌生产胸苷

胸苷是抗艾滋病药物司他夫定(3′-脱氧-2′,3′-双脱氢胸苷)和叠氮胸苷的重要前体物质。应用代谢工程方法对大肠杆菌escherichiacolibl21(de3)生物合成胸苷进行了研究。通过敲除e.colibl21嘧啶回补途径的deoa、tdk和udp三个基因，bs03工程菌株能够积累216mg/l胸苷。为了增加合成胸苷前体物核糖-5-磷酸和nadph的供给，进一步敲除pgi和pyrl使工程菌bs05胸苷的产量提高到90.5mg/l。而通过过表达胸苷合成途径的usha、thya、dut、ndk、nrda和nrdb六个基因，菌株bs08胸苷的产量能达到272mg/l。通过分批补料发酵，bs08最终可以积累1248.8mg/l的胸苷。本研究结果表明经过代谢工程改造的e.colibl21具有良好的胸苷合成能力和应用潜力。