在活体小鼠中筛选lzp3基因rnai有效靶位点的研究

zp3作为精子结合的靶对象在卵母细胞受精中起着关键作用，也因此而成为研究哺乳动物受精机理的焦点。本研究参照新疆草原兔尾鼠卵透明带3（zonapellucida3geneoflaguruslagurus,lzp3）的mrna，选择了针对lzp3mrna的3个区域合成寡聚核苷酸连接到干扰载体pgenesil-1上，构建了3个针对lzp3mrna的重组干扰载体，和pcdna3lzp3表达载体采用脂质体法共转染hela细胞以及通过尾静脉大容量快速注射法（hydrodynamicsbasedtransfectionmethod,hd法）共注射小鼠，半定量rt-pcr和realtimepcr检测hela细胞和小鼠肝脏中lzp3mrna的表达情况，以筛选干扰lzp3mrna的有效靶位点。结果表明，通过hd法共注射干扰载体和表达载体后，外源基因mrna在小鼠肝脏中的表达和共转染hela细胞后在hela细胞中的表达情况是一致的，有2个干扰载体可以有效干扰lzp3mrna的表达。研究还说明，利用hd法以小鼠作为实验材料筛选rna干扰的有效靶位点是一条切实可行的方法。