%0 Journal Article %T 在活体小鼠中筛选lzp3基因rnai有效靶位点的研究 %A 庄淑珍 李菁菁 郑耀虎 张富春* %J 生物工程学报 %D 2006 %X zp3作为精子结合的靶对象在卵母细胞受精中起着关键作用,也因此而成为研究哺乳动物受精机理的焦点。本研究参照新疆草原兔尾鼠卵透明带3(zonapellucida3geneoflaguruslagurus,lzp3)的mrna,选择了针对lzp3mrna的3个区域合成寡聚核苷酸连接到干扰载体pgenesil-1上,构建了3个针对lzp3mrna的重组干扰载体,和pcdna3lzp3表达载体采用脂质体法共转染hela细胞以及通过尾静脉大容量快速注射法(hydrodynamicsbasedtransfectionmethod,hd法)共注射小鼠,半定量rt-pcr和realtimepcr检测hela细胞和小鼠肝脏中lzp3mrna的表达情况,以筛选干扰lzp3mrna的有效靶位点。结果表明,通过hd法共注射干扰载体和表达载体后,外源基因mrna在小鼠肝脏中的表达和共转染hela细胞后在hela细胞中的表达情况是一致的,有2个干扰载体可以有效干扰lzp3mrna的表达。研究还说明,利用hd法以小鼠作为实验材料筛选rna干扰的有效靶位点是一条切实可行的方法。 %K rna干扰 %K 靶位点 %K 共转染 %K 尾静脉大容量快速注射法 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=06060979&flag=1