研究:载脂蛋白e拟肽epk对apoe-/-小鼠动脉粥样硬化的影响

前期设计合成了一种模拟人载脂蛋白e(apoe)结构域的小分子多肽epk，体外实验证实该拟肽具有抑制巨噬细胞炎症及增强高密度脂蛋白(hdl)介导细胞胆固醇外流的作用．本文拟借助慢病毒体系分泌性表达epk，研究epk在体对apoe基因敲除(apoe-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块的影响．将11月龄雌性apoe-/-小鼠18只，随机分两组，分别经眼球后静脉丛注射pwpi慢病毒(lv-gfp对照组)和含epk的重组慢病毒(lv-epk组)．小鼠普食喂养，间隔采血监测血脂状态，检测血浆对氧磷酯酶(pon1)活性，病毒注射18周后小鼠安乐死，从主动脉根部连续冰冻切片及主动脉胸腹段纵剖面(enface)进行油红o染色分析斑块面积，采用实时荧光定量pcr检测小鼠肝脏相关基因的mrna表达水平，蛋白质印迹检测血浆中apoa-ⅰ、pon1及血清淀粉样蛋白a(saa)水平．结果显示：慢病毒感染小鼠可成功在血循环中检测到epk，与lv-gfp对照组比较，lv-epk组apoe-/-小鼠的血脂及脂蛋白分布、apoa-ⅰ水平、pon1活性无明显改变，但epk组小鼠的主动脉斑块面积较对照组显著减少(主动脉根部斑块面积(0.87±0.07)mm2vs(1.03±0.08)mm2，p<0.05；主动脉胸腹段斑块占管腔比42.0%vs55.8%，p<0.01)．epk可显著降低血中saa水平，并抑制肝脏炎症因子tnf?琢和il-6的表达．结果说明，epk拟肽具有减退apoe-/-小鼠动脉粥样硬化斑块的作用，其机制可能与其发挥的抗炎作用有关．