pedvs蛋白b细胞抗原表位的筛选和鉴定

以猪流行性腹泻病毒(porcineepidemicdiarrheavirus，pedv)s基因的免疫优势区s1(1～2367bp)为靶基因，利用基于gⅲ表达外源多肽的fd丝状噬菌体展示系统，构建s1基因噬菌体展示肽库，以纯化病毒制备的兔抗pedv多克隆血清为靶蛋白，对s1基因噬菌体展示肽库进行3轮生物淘选，结果获得3个高亲和力的序列，分别命名为s1p1(248～280位氨基酸)、s1p2(442～499位氨基酸)和s1p3(697～742位氨基酸).elisa和蛋白质印迹结果显示，s1p1、s1p2和s1p3短肽都能被兔抗pedv多克隆血清识别，其中s1p3反应性最强.为了进一步揭示s1p1、s1p2和s1p3短肽的抗原性，制备了3个短肽gst融合蛋白和它们串连后gst融合蛋白的单因子血清，间接免疫荧光试验(ifa)结果证实，抗s1p2-gst、s1p3-gst和s1p123-gst融合蛋白的单因子血清能够识别vero细胞培养物中天然的pedv.