禽流感病毒ha基因真核表达质粒的构建与表达

血凝素蛋白（ha）基因是禽流感病毒（aiv）重要的保护性抗原基因.为了研究ha基因疫苗，用pcr扩增h5亚型aivha基因，将其克隆到质粒pcdna4/hismax和prc/cmv上得到真核表达质粒pc4h5和pcmvh5.采用tfxtm-20、superfect转染试剂和电转染法转染hela细胞，转染后的hela细胞经蛋白质印迹和血凝试验检测ha蛋白及其活性.结果表明，superfect转染和电转染均能正确表达ha蛋白并具有生物学活性，蛋白质印迹检测到ha和ha裂解的ha1和ha2，与aiv的ha、ha1、ha2蛋白的分子质量一致.从血凝试验结果看，superfect和电转染表达的ha均具有血凝活性，而经superfect转染的pc4h5的表达量是pcmvh5的8倍，表明pc4h5是一高效的真核表达质粒.