%0 Journal Article %T 禽流感病毒ha基因真核表达质粒的构建与表达 %A 张强哲? %A 秦曦明? %A 梁荣? %A 邓明俊? %A 何宏轩? %A 张彦明? %A 郑昌学? %A 段明星? %J 生物化学与生物物理进展 %D 2003 %X 血凝素蛋白(ha)基因是禽流感病毒(aiv)重要的保护性抗原基因.为了研究ha基因疫苗,用pcr扩增h5亚型aivha基因,将其克隆到质粒pcdna4/hismax和prc/cmv上得到真核表达质粒pc4h5和pcmvh5.采用tfxtm-20、superfect转染试剂和电转染法转染hela细胞,转染后的hela细胞经蛋白质印迹和血凝试验检测ha蛋白及其活性.结果表明,superfect转染和电转染均能正确表达ha蛋白并具有生物学活性,蛋白质印迹检测到ha和ha裂解的ha1和ha2,与aiv的ha、ha1、ha2蛋白的分子质量一致.从血凝试验结果看,superfect和电转染表达的ha均具有血凝活性,而经superfect转染的pc4h5的表达量是pcmvh5的8倍,表明pc4h5是一高效的真核表达质粒. %K 禽流感病毒 %K ha基因 %K 真核表达质粒 %K 表达 %K 生物活性 %U http://www.pibb.ac.cn/pibbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20030330&flag=1