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ISSN: 2333-9721
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毛竹psbs基因的克隆及其原核表达特征研究

DOI: 10.3969/j.issn.1005-3395.2011.06.004, PP. 513-518

Keywords: 毛竹,psbs基因,克隆,载体构建,原核表达,温度

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Abstract:

采用rt-pcr技术从毛竹(phyllostachysedulis)叶片中克隆到1个psbs基因,命名为pepsbs(genbankno.fj600727),其编码区为810bp,编码269个氨基酸。序列分析表明,pepsbs编码的蛋白与其它单子叶植物的psbs蛋白有很高的相似性。蛋白结构分析表明,pepsbs基因编码蛋白包含导肽部分和成熟蛋白,其中成熟蛋白包含4个跨膜结构域。将pepsbs基因编码成熟蛋白的序列构建到原核表达载体pet23a中,并转入大肠杆菌,用iptg进行诱导表达。结果表明,41℃下诱导4h的表达效果最好,目的蛋白含量约占总蛋白的21.5%,分子量约为22.0kd。这说明温度和诱导时间明显影响pepsbs基因的表达。

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