薇甘菊水杨酸羧甲基转移酶基因的分离鉴定及表达分析

为研究水杨酸羧甲基转移酶基因在植物防御系统中的作用，采用race法从薇甘菊(mikaniamicrantha)cdna文库中克隆到薇甘菊水杨酸羧甲基转移酶基因samt全长cdna，并进行外源表达以及水杨酸诱导模式分析。结果表明，该基因cdna全长1299bp，其中编码区长1089bp，编码362个氨基酸，blast显示该基因编码的氨基酸序列与仙女扇(clarkiabreweri)的相似性为74%，证实其主要功能是将水杨酸(salicylicacid，sa)甲基化成水杨酸甲酯(methylsalicylate，mesa)，由此将该基因命名为mmsamt，genbank登录号为fj869889。将mmsamt编码序列克隆至pet-32a(+)载体,转化rosetta-gami(de3)中表达，sds-page显示单体分子量在40kd左右，与预测结果一致。westernblot显示在20℃、0.05mmol/liptg和180rmin-1下诱导6h，可获得较多的可溶性蛋白质。对喷施100μmol/lsa薇甘菊叶片中mmsamt的转录谱进行研究，该基因的诱导受到sa的激活，48h的表达水平达最高，暗示mmsamt可能通过催化合成mesa引发系统获得性抗性，提高抗性防御的警戒等级。