%0 Journal Article %T 薇甘菊水杨酸羧甲基转移酶基因的分离鉴定及表达分析 %A 王文天? %A 彭少麟? %A 李冬梅? %A 王冬梅? %A 王瑞龙? %A 田彩娟? %A 赵厚本? %A 户桂敏? %J 热带亚热带植物学报 %P 445-450 %D 2009 %R 10.3969/j.issn.1005-3395.2009.5.2339 %X 为研究水杨酸羧甲基转移酶基因在植物防御系统中的作用,采用race法从薇甘菊(mikaniamicrantha)cdna文库中克隆到薇甘菊水杨酸羧甲基转移酶基因samt全长cdna,并进行外源表达以及水杨酸诱导模式分析。结果表明,该基因cdna全长1299bp,其中编码区长1089bp,编码362个氨基酸,blast显示该基因编码的氨基酸序列与仙女扇(clarkiabreweri)的相似性为74%,证实其主要功能是将水杨酸(salicylicacid,sa)甲基化成水杨酸甲酯(methylsalicylate,mesa),由此将该基因命名为mmsamt,genbank登录号为fj869889。将mmsamt编码序列克隆至pet-32a(+)载体,转化rosetta-gami(de3)中表达,sds-page显示单体分子量在40kd左右,与预测结果一致。westernblot显示在20℃、0.05mmol/liptg和180rmin-1下诱导6h,可获得较多的可溶性蛋白质。对喷施100μmol/lsa薇甘菊叶片中mmsamt的转录谱进行研究,该基因的诱导受到sa的激活,48h的表达水平达最高,暗示mmsamt可能通过催化合成mesa引发系统获得性抗性,提高抗性防御的警戒等级。 %K 薇甘菊 %K samt %K race %K 原核表达 %K western %K blot %K rt-pcr %U http://jtsb.scib.ac.cn/jtsb_cn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=2339&flag=1