重组融合蛋白mbp-bsh在大肠杆菌中的表达及其纯化、功能鉴定

？选择if2融合标签，另选择含sumo、gst、nusa和mbp融合标签的质粒构建表达载体。sds-page电泳结果显示，重组菌escherichiarosetta(de3)(pls932-bsh)的诱导表达细胞提取液上清出现了明显的融合蛋白mbp-bsh条带，经诱导表达条件优化后，mbp-bsh可溶性大幅度提高。用ni-ntaresin和amyloseresin分别进行目标蛋白纯化，结果显示前者效果更好，并且c端融合his-tag更有利于其与ni离子结合，mbp-bsh蛋白纯化量更大，杂带更少。茚三酮显色反应测定酶活力，结果显示纯化后的mbp-bsh的酶比活力为2.4282u/mg。