苦荞过敏蛋白全长基因的克隆、表达及免疫学活性研究

荞麦属于一种常见的植物性过敏原。本实验在以往研究的基础上，以苦荞种子总RNA 为模板，通过RTPCR和5'-RACE 等方法，扩增、克隆获得苦荞过敏蛋白全长cDNA 序列。分析表明，该序列编码一个由515 个氨基酸残基组成的功能蛋白，并与甜荞过敏性贮藏蛋白的氨基酸序列同源性达到90% 以上。经原核表达及一步亲和纯化后得到纯度较高的重组苦荞过敏蛋白(rTBt)。采用竞争性ELISA 对其免疫活性分析显示，目的蛋白与荞麦过敏病人血清中的IgE 抗体可以特异结合