β-1,3-1,4-葡聚糖酶高产菌诱变选育及基因克隆表达

为获得β-1,3-1,4-葡聚糖酶高产菌株，以高地芽孢杆菌YC-9为出发菌株，通过亚硝基胍（nitrosoguanidine，NTG）和低能N+束诱变育种，筛选和选育得到两株突变株N-2-2和10-30s-3，发酵培养60 h，酶活力分别达到28.6 U/mL和36.1 U/mL，分别是出发菌株的2.36 倍和2.98 倍，与YC-9菌株相比，突变菌株菌体生长下降但发酵产酶量增加。进一步将β-1,3-1,4-葡聚糖酶克隆并在大肠杆菌中成功表达，经过30 ℃诱导6 h后，胞内酶活力达79.2 U/mL，为出发菌株的6.5 倍