孔雀石绿人工抗原的合成及多克隆抗体的制备

通过研究孔雀石绿(MG)抗原的合成和多克隆抗体的制备，探索研究食品中孔雀石绿残留的检测方法。本实验先合成含有羧基的孔雀石绿半抗原(CMG)，并用液-质联用法进行分析鉴定。半抗原经重氮化法处理后分别偶联两种载体蛋白BSA和OVA，并通过紫外分光光度法进行鉴定。与CMG标准品和两种载体蛋白的紫外吸收光谱相比，偶联物的吸收峰发生了明显的偏移，计算得免疫原的偶联比为10.6:1，说明偶联成功。通过免疫制备多克隆抗体，并通过间接ELISA法对CMG抗血清的效价进行检测，并进一步检测抗体的特异性，两只兔子的IC50值分别为8.1ng/mL和4.6ng/mL