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物理化学学报 1996
鹰嘴豆β-半乳糖苷酶的分离纯化与表征Keywords: β-半乳糖苷酶,鹰嘴豆,分离纯化,表征,酶催化作用 Abstract: 从鹰嘴豆中分离得到了三种β-半乳糖苷酶(酶ⅰ、酶ⅱ和酶ⅲ).将酶ⅰ和酶ⅱ进一步纯化,其比活力分别提高了19倍和48倍.酶活力回收率分别为16%和18%,测得它们的表观分子里分别为2.4×104和5.8×104,最适ph分别5.9和5.0,最适温度分别为55℃和45℃.酶ⅰ水解onpg和pnpg的km分别为33×10-2mol?dm-3和60×10-3mol?dm-3;酶ⅱ水解onpg和pnpg的km分别为30×10-3mol?dm-3和60×10-4mol?dm-3.乳糖和半乳糖为该酶的竞争性可逆抑制剂,棉子糖为非竞争性可逆抑制剂.该酶受hg2+和pcmb强烈抑制和nem明显抑制,而mg2+、zn2+和ca2+具有激活作用,推知巯基(-sh)是酶活性中心必须基团.
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