优化的小鼠sto细胞系重编程多功能干细胞的建立

？研究鼠胚成纤维细胞系sto(sim-6-thiogunanie-oualiain)诱导为多功能干细胞(inducedpluripotentstemcells)，(sto-ipscs)。通过磷酸钙法将连接有oct4、sox2、klf4和c-myc4个转录因子的慢病毒载体fuw-oskm转染293ft细胞包装病毒，然后用病毒感染sto细胞，以干细胞培养条件培养。挑取诱导15d的克隆并在有饲养层和无饲养层的培养体系中培养。对获取的sto-ipscs进行生物学特性分析，具有典型胚胎干细胞的形态特征，碱性磷酸酶染色呈阳性；qpcr结果表明，表达很高的原癌基因nanog和oct4mrnas；免疫细胞化学表明，表达胚胎干细胞特异性标志nanog和oct4，并且能够体外诱导分化为神经细胞。实验获得了sto-ipscs，建立了sto-ipscs无饲养层培养体系。