%0 Journal Article %T 优化的小鼠sto细胞系重编程多功能干细胞的建立 %A 权富生 %A 刘琴 %A 吴月红 %A 吴海波 %A 张涌 %J 农业生物技术学报 %P 1106-1116 %D 2012 %X ?研究鼠胚成纤维细胞系sto(sim-6-thiogunanie-oualiain)诱导为多功能干细胞(inducedpluripotentstemcells),(sto-ipscs)。通过磷酸钙法将连接有oct4、sox2、klf4和c-myc4个转录因子的慢病毒载体fuw-oskm转染293ft细胞包装病毒,然后用病毒感染sto细胞,以干细胞培养条件培养。挑取诱导15d的克隆并在有饲养层和无饲养层的培养体系中培养。对获取的sto-ipscs进行生物学特性分析,具有典型胚胎干细胞的形态特征,碱性磷酸酶染色呈阳性;qpcr结果表明,表达很高的原癌基因nanog和oct4mrnas;免疫细胞化学表明,表达胚胎干细胞特异性标志nanog和oct4,并且能够体外诱导分化为神经细胞。实验获得了sto-ipscs,建立了sto-ipscs无饲养层培养体系。 %K 慢病毒载体 %K sto细胞 %K 诱导多功能干细胞(ipscs) %K 胚胎干细胞 %U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract9808.shtml