中华鼢鼠卵透明带3基因(mzp3)真核表达载体的构建及其在中国仓鼠卵巢(cho)细胞中的表达

？卵透明带3(zonapellucida3,zp3)蛋白是精卵结合最重要的受体。为了构建中华鼢鼠(myospalaxfontanierii)卵透明带3(mzp3)基因真核表达载体，本研究利用pcr方法得到加入酶切位点的mzp3片段，并将其克隆到真核表达载体pegfp-n1上，体外转染中国仓鼠卵巢细胞(chinesehamsterovarycell,chocell)和尾静脉注射昆明小鼠(musmusculus)体内，利用rt-pcr和westernbolt技术检测其表达情况。双酶切和基因测序鉴定结果表明，所构建的表达载体是pegfp-mzp3；倒置显微镜观察到发绿色荧光的成功转染的细胞；rt-pcr和westernbolt检测结果表明，目的基因mzp3在cho细胞中成功表达，并且小鼠肝脏内也检测到目的基因。研究结果表明，卵透明带3基因能够在cho真核细胞内表达，为后期基因疫苗防治中华鼢鼠提供依据。