%0 Journal Article %T 中华鼢鼠卵透明带3基因(mzp3)真核表达载体的构建及其在中国仓鼠卵巢(cho)细胞中的表达 %A 张冬辉 %A 郑雪莉 %A 李昊 %A 周智敏 %A 吴景龙 %A 隋丹丹 %A 韩崇选 %J 农业生物技术学报 %P 329-336 %D 2015 %X ?卵透明带3(zonapellucida3,zp3)蛋白是精卵结合最重要的受体。为了构建中华鼢鼠(myospalaxfontanierii)卵透明带3(mzp3)基因真核表达载体,本研究利用pcr方法得到加入酶切位点的mzp3片段,并将其克隆到真核表达载体pegfp-n1上,体外转染中国仓鼠卵巢细胞(chinesehamsterovarycell,chocell)和尾静脉注射昆明小鼠(musmusculus)体内,利用rt-pcr和westernbolt技术检测其表达情况。双酶切和基因测序鉴定结果表明,所构建的表达载体是pegfp-mzp3;倒置显微镜观察到发绿色荧光的成功转染的细胞;rt-pcr和westernbolt检测结果表明,目的基因mzp3在cho细胞中成功表达,并且小鼠肝脏内也检测到目的基因。研究结果表明,卵透明带3基因能够在cho真核细胞内表达,为后期基因疫苗防治中华鼢鼠提供依据。 %K 中华鼢鼠 %K 卵透明带3(zp3) %K 真核表达 %K 免疫不育 %K 蛋白免疫印迹 %U http://www.jabiotech.org.cn/CN/abstract/abstract10282.shtml