小鼠卵丘细胞对牛卵母细胞体外成熟和孤雌发育的影响

？本实验通过牛生发泡(gv)期无卵丘细胞卵母细胞-裸卵(denudedoocytes,dos)与小鼠卵丘细胞(mousecumuluscells,mccs)共培养，研究异种mccs对牛dos体外成熟和孤雌激活后发育的影响，进而探讨卵丘细胞对卵母细胞的作用机制，为牛卵母细胞体外成熟效率提高提供实验依据。牛卵母细胞分为cocs(cumulus-oocytescomplexes)组、dos+bccs(bovinecumuluscells,bccs)组、dos+mccs组和dos组4个组合，体外成熟22~24h后，检测各组卵母细胞第一极体排出率、mⅱ期卵母细胞中谷胱甘肽(glutathione，gsh)含量和孤雌激活后的发育能力，以及卵母细胞内骨形态发生蛋白15(bmp15)和生长分化因子9(gdf9)mrna相对表达水平。结果表明：(1)dos+mccs组和dos+bccs组卵母细胞核成熟率[(68.48±5.71)%，(71.00±4.27)%]显著低于cocs组(84.70±3.41)%(p<0.05)，但均显著高于dos组(54.26±5.03)%(p<0.05)；(2)dos+mccs组mⅱ卵母细胞gsh含量和孤雌激活囊胚率[(2.48±0.24)pmol/oocyte，(44.19±4.03)%]与dos+bccs组[(2.49±0.18)pmol/oocyte，(48.57±5.20)%]和dos组[(2.40±0.17)pmol/oocyte，(43.47±7.34)%]之间没有差异，但分别显著低于cocs组[(9.67±0.18)pmol/oocyte，(59.93±6.13)%](p<0.05)，各组孤雌激活卵裂率之间没有显著差异[(98.85±4.32)%，(92.11±2.00)%，(95.40±4.11)%，(93.18±3.19)%](p>0.05)；(3)dos+mccs组、dos+bccs组和cocs组卵母细胞中bmp15和gdf9mrna相对表达水平均显著性高于dos组(p<0.05)，其中，dos+mccs组和cocs组gdf9mrna相对表达水平显著高于dos+bccs组(p<0.05)。实验结果表明，mccs能提高牛dos的核成熟率及bmp15和gdf9mrna相对表达水平，但对牛dos的细胞质成熟和mⅱ卵母细胞孤雌激活胚胎囊胚发育没有促进作用，说明卵丘细胞通过一些旁分泌因子促进卵母细胞核成熟，且这些因子的作用可能没有种属特异性。